Descripción:
En la optimización de bioprocesos, uno de los desafíos más significativos es el control del metabolismo bacteriano. Naturalmente, bacterias como Escherichia coli priorizan un crecimiento acelerado, destinando gran parte de su energía a la síntesis de ribosomas. Sin embargo, este crecimiento rápido suele conducir a la formación de subproductos como el acetato, lo que reduce la eficiencia en procesos biotecnológicos. En este contexto, esta tesis investiga la proteína TraR, una proteína pequeña de 73 aminoácidos capaz de simular la “respuesta estricta” bacteriana, un mecanismo de supervivencia que normalmente se activa ante la limitación de nutrientes y que reprograma las prioridades celulares. El propósito central de este trabajo fue evaluar el uso de TraR como una posible herramienta de reprogramación celular en distintas condiciones nutricionales. Para ello, se indujo su expresión mediante IPTG y se analizó su impacto sobre el crecimiento y el metabolismo de Escherichia coli. Los resultados demostraron que el efecto de la expresión de TraR depende de la concentración de IPTG y del momento de inducción. Una inducción desde el inicio del cultivo y a una concentración más alta redujo de manera más marcada el efecto sobre la velocidad máxima de crecimiento, mientras que una inducción en fase exponencial temprana y a menor concentración afectó principalmente la densidad óptica máxima alcanzada. Estos efectos se observaron tanto en medios ricos como en medios limitados en nutrientes. El análisis metabólico mediante HPLC reveló una disminución en el consumo de glucosa y en la producción de acetato, así como la detección de succinato en los cultivos que expresaban TraR. Estos resultados sugieren que TraR no sólo influye en el crecimiento, sino que posee la cualidad de redirigir el flujo de carbono hacia otras rutas como el ciclo del 5 ácido tricarboxílico, aprovechando mejor la energía y los recursos de la célula. Aunque los datos obtenidos evidencian un cambio metabólico claro, es necesario realizar experimentos para comprender los mecanismos moleculares exactos mediante los cuales TraR ejerce este efecto. No obstante, los resultados de este trabajo indican que TraR puede representar una herramienta útil en biología sintética y en la optimización de cepas bacterianas, especialmente en procesos donde se busca reducir la formación de subproductos y mejorar el aprovechamiento del sustrato para la producción de metabolitos de interés industrial.