La leche de vaca es un producto que aporta gran cantidad de componentes nutricionales al humano. El objetivo de esta investigación fue evaluar la persistencia y el perfil de ácidos grasos en leche de vacas en estabulación con la inclusión del 3% de semilla de linaza molida en la dieta. Se utilizaron 12 vacas primíparas Holstein, en el segundo tercio de lactación con un peso de 543 ± 77 kg y una producción promedio de leche de 30.6 litros al día. Las vacas fueron asignadas al azar en un diseño de bloques completamente al azar con días de medición (0 d, 5 d, 10 d, 15 d, 20 d, 25 d, 30 d, 35 d, 40 d y 45 d). Los tratamientos fueron: 1) Testigo: Dieta completamente mezclada, 2) Linaza: Dieta completa mezclada con la inclusión de 3 % de linaza molida sobre la materia seca. Los datos obtenidos se analizaron con el modelo mixto Yijk = μ + Ai + Tj + Dk + (T*D)jk + Ԑijkl del programa estadístico SAS (2002). Se utilizó la prueba de Tukey para la comparación de medias (p < 0.05). Se observaron diferencias (p < 0.05) en el aumento de los ácidos grasos insaturados ácido linoleico conjugado (CLA) (día 15 y 20) y oleico (día 15 y 25) y disminuyeron los ácidos grasos saturados, principalmente el palmítico, lo que indica que la respuesta de la linaza es dinámica y depende del momento de la suplementación. En conclusión, incluir 3 % de semilla de linaza molida en la dieta de vacas primíparas en estabulación mejora el perfil lipídico de la leche a partir del día 15 de suplementación; sin embargo, al suspender la semilla de linaza existe una gran variabilidad en la concentración de los ácidos grasos en la leche.