El continente Americano es considerado el centro de origen del género Agave, con 200 especies, de las cuales 125 se encuentran en el territorio mexicano, representando más de la mitad de las especies descritas en el continente. Estas plantas se encuentran facultadas para sobrevivir en condiciones climáticas adversas, principalmente originadas por temperatura y sequía; Agave celsii Hook. var. celsii, forma grupos de rosetas blandas y suculentas de 100 a 120 cm de diámetro, crece sobre peñascos de roca calcárea, donde el efecto de la baja disposición de agua en el sustrato altera la capacidad germinativa de las semillas. El objetivo del presente trabajo es determinar el comportamiento germinativo de las semillas y el desarrollo de plántulas de Agave celsii var. celsii en condiciones controladas (in vitro); utilizando diferentes concentraciones de manitol 0, 75, 85 y 105 g/l, en el medio MS; y evaluar la supervivencia en condiciones controladas (ex vitro). Se evaluó el potencial hídrico (ψA) de cada concentración, así como la germinación durante 30 días, y supervivencia después de 12 semanas en condiciones controladas ex vitro. Obteniendo los potenciales hídricos (ψA) de - 0.87 -1.58, -1.61, -1.79 Mpa, para 0; 75, 85 y 105 g/l de manitol, se observó que los porcentajes de germinación y supervivencia en condiciones ex vitro fueron disminuyendo a medida que se incrementó la concentración de manitol presentando 74.7, 14, 11, 8.3 % en las concentraciones de manitol, con 82.1, 52.8, 36.4 y 5.3 % de supervivencia en condiciones ex vitro respectivamente.