Objetivo: Esta investigación tiene como objetivo general identificar los microorganismos aislados en hemocultivos en pacientes hospitalizados de edad neonatal del Hospital General Dra. Columba Rivera Osorio en el periodo de septiembre del 2020 a septiembre del 2023. Material y método: El presente trabajo se realizó en las instalaciones del Hospital General Columba Rivera Osorio. Se realizó un estudio de investigación descriptivo, retrospectivo de corte transversal. Las variables fueron investigadas y se utilizó como técnica la observación y como instrumento la hoja de recolección de datos. Resultados: Se revisaron 233 expedientes, de esos 26 (11.11%), tuvieron sepsis neonatal de los cuales se hemocultivaron en total 18, teniendo positivos 9 (50%). Citrobacter Freudii fue el más frecuente con un 22.22%, Seguido de Staphylococcus Capitis 11.11%, Staphylococcus aureus 11.11%, Staphylococcus warneri 11.11%, Staphylococcus Saprophyticus 11.11%, Staphylococcus Hominis Ssp Homonis 11.11%, Staphylococcus coagulasa negativo 11.11% y Enterococcus Casseliflavus / gallinarum 11.11%. La relación por clasificación de sepsis neonatal fue sepsis temprana 24 casos (92.3%), Sepsis Tardía 2 (7.69%), Por edad de gestación fue mayor en RN de Término 14 casos (53.84%), RN Pretérmino 12 casos (46.15%), la relación hombre mujer es de 1:1 y la relación de acuerdo con el año de presentación en el año 2023 3 casos (11.53%), 2021 total 14 casos (53.84%), 2022 4 casos (15.38%) y 2023 5 casos (19.23%). Conclusiones: Los microorganismos aislados en este trabajo, en los hemocultivos de pacientes hospitalizados en el área de Neonatología del Hospital predomina los Staphylococcus, en sus distintas clasificaciones. De acuerdo a los resultados obtenidos, los pacientes hospitalizados en el área de Neonatología, en el Hospital General Dra. Columba Rivera Osorio, en el periodo de septiembre del 2020 a septiembre del 2023, que cursaron con sepsis neonatal la forma de presentación fue sepsis temprana, de los microorganismos reportados en la literatura y los encontrados en este estudio, son algunos similares, como Enterococcus, Staphylococcus aureus sin embargo son de las causas menos comunes en Sepsis Neonatal.