La tuberculosis bovina es una enfermedad producida por Mycobacterium bovis, que puede afectar a gran número de especies domésticas, silvestres y al hombre, por lo que es considerada una zoonosis. En países en vías de desarrollo la infección por M. bovis es un problema de salud pública debido a la prevalencia de la enfermedad en el ganado bovino. En el sector ganadero ocasiona disminución en la producción de carne, leche y pérdidas económicas, por lo que se requiere de pruebas más específicas para que el diagnóstico de la enfermedad sea más eficaz. Una de estas pruebas que se han desarrollado mide la producción de interferón gamma (IFN-γ) liberado por los linfocitos sensibilizados in vitro con antígenos específicos, incluyendo la proteína ESAT-6, haciendo la prueba más específica y capaz de complementar la prueba de tuberculina. El objetivo de este trabajo fue determinar la especificidad y sensibilidad del Ensayo de Liberación de IFN-γ a través del Bovigam®, de los antígenos PPD bovino y ESAT-6, en bovinos sin prueba de tuberculina reciente para promover su valor diagnóstico. Se evaluaron 527 animales, 464 reactores a la prueba de tuberculina y 63 no reactores por medio del Bovigam®. La especificidad del Ensayo de Liberación de INF-γ para el antígeno PPD bovino, considerando un punto de corte ≥0.10, fue del 100%, con una sensibilidad de 65.1%, mientras que para el antígeno ESAT-6, considerando un punto de corte de ≥0.10, fue de 100% de especificidad y la sensibilidad de 46.6% respectivamente, lo que hace que sea una prueba confiable en hatos con baja prevalencia de la enfermedad, donde se descarta de manera eficaz a los animales verdaderos negativos.