En el presente estudio se analizaron 97 muestras de sangre de una población mestiza de la Ciudad Universitaria, Universidad Autónoma del Estado de Hidalgo en Pachuca, Hidalgo, México. Se realizó la extracción y amplificación del DNA mitocondrial mediante el método de Bailliet y colaboradores (1994). Las enzimas de restricción utilizadas para determinar las frecuencias de los haplogrupos amerindios (A, B, C, D) del DNA mitocondrial fueron: HaeIII, HincII, AluI, y HpaI. Además, se estudiaron los haplogrupos H y L como controles. Los resultados revelaron que la población mestiza de Pachuca presenta frecuencias que oscilan entre los cuatro haplogrupos amerindios.