Los xoconostles (Opuntia spp.) son tunas ácidas utilizadas en la gastronomía y la medicina tradicional mexicana, ricos en compuestos funcionales, como antioxidantes y fibra dietética, lo que los convierte en fuentes prometedoras de polisacáridos bioactivos. El objetivo de este estudio fue caracterizar las propiedades fisicoquímicas, macromoleculares y biológicas de los polisacáridos pécticos (PP) extraídos del fruto de xoconostle (Opuntia spp.), con el fin de analizar su potencial actividad biológica y establecer la relación existente entre dicha actividad y su estructura molecular. Se utilizó un método ecológico para extraer PP del xoconostle (O. matudae), mediante el cual se obtuvo un rendimiento de 0.105 gPP/gxoconostle. Se evaluaron las propiedades fisicoquímicas y la actividad antimicrobiana del PP contra ocho patógenos. La espectroscopía infrarroja y los análisis químicos confirmaron que PP es una pectina (XP) con alto contenido de ácido galacturónico (78.9 ± 0.002 mg/gXP), bajo grado de esterificación (32.84 ± 0.02%), valor de pKa de 5.3 ± 0.06, con ácido ferúlico (9.35 ± 0.01 mg/gXP) y compuestos fenólicos (2.37 mgequivalentes ácido gálico/gXP ± 0.001) dentro de su estructura. A través de cromatografía de exclusión por tamaño se determinó una masa molecular promedio en peso de Mw = 230.3 ± 12.88 kDa y un índice de polidispersidad de 3.5. Las dispersiones acuosas de XP (0.5-1%) mostraron un comportamiento reológico del tipo pseudoplástico; con índices de consistencia y de flujo entre 0.04 y 17.7 Pasn y 0.8 a 0.32, respectivamente. La actividad antioxidante fue evaluada en los radicales DPPH y ABTS, obteniendo un porcentaje de captación de los radicales de 23.89 ± 0.05% y 65.11± 0.04%, respectivamente, en soluciones de XP de 0.5 a 3 mg/mL. La actividad antimicrobiana se evaluó mediante la concentración mínima inhibitoria (CMI). XP inhibió el crecimiento de Escherichia coli, Shigella flexneri, Salmonella spp., Pseudomonas aeruginosa, Listeria monocytogenes, Staphylococcus aureus, Candida albicans y Candida parapsilosis. La CMI osciló entre 1 y 3 mgXP/mL. Nuestros resultados demuestran que XP es un biopolímero sostenible con valiosas propiedades antimicrobianas y antioxidantes.