Estudios anteriores han demostrado que las bacterias del género Xenorhabdus producen metabolitos con actividad antimicrobiana. En este trabajo se llevaron a cabo fermentaciones con un volumen de 30 mL a una temperatura de 28°C y 130 rpm en oscuridad por 72 horas. El medio de cultivo fue caldo de soya tripticasa adicionada con 0.5% p/v de extracto de levadura. La máxima tasa de crecimiento fue de 0.22 h⁻¹ y ocurrió a las 10 h, con una Xmáx de 4.91 g/L (DE=0.25). La demanda de oxígeno (OUR) se encuentra en el rango de 10-100 mmol O₂ g⁻¹ h⁻¹. El sobrenadante libre de células de las 48 horas de fermentación fue el que presentó mayor actividad antimicrobiana contra los microorganismos evaluados. Posteriormente, la fracción acuosa se separó de la fracción orgánica utilizando acetato de etilo. La fracción acuosa, mostró mayor actividad antimicrobiana por lo que se procedió a su purificación la cual consistió de 2 etapas, en la primera etapa se concentró el sobrenadante libre de células de un volumen de 200 mL a 5 mL, el concentrado se colocó en una columna cromatográfica empacada con Bio-Gel P30, colectando 40 fracciones de 2 mL cada una, la velocidad de flujo fue de 0.66 mL/min. En la segunda etapa las fracciones que exhibieron mayor potencial antimicrobiano fueron purificadas usando RP HPLC. La fracción que eluyó entre el minuto 1.05 y 1.35, tuvo la mayor actividad antimicrobiana contra los microorganismos evaluados (Listeria monocytogenes CFQ-103, Staphylococcus aureus ATCC-25923, Escherichia coli ATCC- 25922, Salmonella typhimurium, Pseudomonas aeruginosa, Shigella flexneri, Candida albicans ATCC 10231 y Candida parapsilosis).