Antecedentes: se han llevado a cabo diversas investigaciones sobre el incremento de los costos directos atribuibles a las Infecciones asociadas a la atención a la salud, se estima que 1 de cada 10 pacientes hospitalizados adquirirá una infección durante su estancia hospitalaria que conllevará aumento de la estancia hospitalaria, intervenciones diagnósticas y terapéuticas adicionales. Objetivo: comparar los costos directos de las Infecciones Asociadas a la Atención de la Salud en pacientes hospitalizados en la Unidad de Cuidados Intensivos Neonatales en el Hospital General Pachuca de enero a diciembre 2023 a través de la aplicación de protocolo de la OPS. Material y Métodos: se realizará un estudio transversal, analítico y retrolectivo, en el periodo de enero a diciembre del año 2023 en la Unidad de Cuidados Intensivos Neonatales del Hospital General Pachuca, sobre los costos en salud directos, atribuidos a la presencia de las Infecciones Asociadas a la Atención a la Salud (IAAS) en neonatos infectados y notificados en la RHOVE, con una estancia hospitalaria mayor a 3 días. Se utilizará el formulario recomendado por la OPS, para determinar los costos atribuibles de las IAAS. Resultados: la población total incluyó 62 neonatos: 79% casos y 21% controles. La media de estancia hospitalaria fue significativamente mayor en el grupo de casos (38.47 días) que en los controles (17.77 días). El peso al nacer fue menor en los casos (1,719 g) comparado con controles (2,122 g), observándose una correlación negativa fuerte entre peso al nacer y estancia hospitalaria (r = –0.523; p < 0.001). El número de cultivos mostró una diferencia marcada: 3.94 cultivos por paciente en los casos vs. 1.08 en controles. Se identificó una correlación positiva y significativa entre días de estancia y número de cultivos (r = 0.663; p < 0.001). En cuanto al uso de antibióticos, la ampicilina y amikacina fueron los más prescritos, mientras que los antibióticos de mayor costo fueron meropenem, linezolid, imipenem y tigeciclina. El costo total estimado por antimicrobianos ascendió a $420,000 MXN, concentrándose el 86% del gasto en antibióticos de reserva. Discusión: los hallazgos confirman que las IAAS en neonatos incrementan de forma sustancial la estancia hospitalaria, el consumo de recursos diagnósticos y terapéuticos, así como los costos directos asociados a la atención. El bajo peso al nacer emergió como un factor determinante para una mayor probabilidad de adquirir IAAS y prolongar la hospitalización, consistente con la evidencia internacional que señala que los neonatos prematuros y de bajo peso presentan mayor morbilidad infecciosa. El número elevado de cultivos en los casos evidencia la complejidad clínica de esta población y la necesidad de confirmar diagnósticos infecciosos ante la presencia de signos de sepsis. Asimismo, el uso intensivo de antimicrobianos de amplio espectro y de alta reserva refleja la presencia de microorganismos potencialmente multirresistentes, lo que incrementa los costos y subraya la importancia de estrategias institucionales robustas de control de infecciones y uso racional de antibióticos. Los resultados de este estudio coinciden con otros realizados en Latinoamérica que documentan que los costos por IAAS en UCIN pueden duplicar o triplicar los costos de atención frente a neonatos no infectados, siendo el incremento de días-cama el componente más determinante en el gasto total. Conclusiones: las IAAS en la UCIN del Hospital General Pachuca generan un impacto económico significativo, aumentando la estancia hospitalaria, el número de cultivos, el uso de antimicrobianos y, en consecuencia, los costos directos de atención. El bajo peso al nacer es un predictor clave de mayor riesgo de IAAS y de estancias hospitalarias prolongadas. Los resultados obtenidos justifican la necesidad de fortalecer las estrategias institucionales de prevención y control de IAAS, incluyendo programas de higiene de manos, vigilancia epidemiológica activa, capacitación del personal, monitoreo del uso de dispositivos invasivos y políticas de optimización de antimicrobianos. Implementar estas medidas podría reducir de manera importante los costos institucionales y mejorar los desenlaces clínicos en la población neonatal.