El fracaso de tratamiento de endodoncia se debe principalmente a que algunas bacterias logran sobrevivir a los procedimientos de desinfección, tanto del canal radicular, como de sus materiales de obturación como la gutapercha. El objetivo del presente estudio experimental in vitro fue determinar el efecto antibacteriano de compuestos de cálices de jamaica (Hibiscus sabdariffa) variedad Tecoanapa de Guerrero en la inhibición de Enteroccoccus faecalis y Streptococcus sanguinis sobre puntas de gutapercha. Para ello se utilizaron extractos acuosos, etanólicos, acetónicos y de acetato de etilo a partir de cálices de Hibiscus sabdariffa variedad Teconapa de Guerrero, comparados con la actividad de irrigantes y desinfectantes que se utilizan actualmente en endodoncia como hipoclorito de sodio (NaClO), EDTA® y clorhexidina utilizando técnica de difusión en placa mediendo los halos de inhibición. También se determinó la Concentración Mínima Inhibitoria (CMI) y la Concentración Mínima bactericida (CMB) de los extractos mediante el método de macro dilución en caldo y técnica de vertido en placa. Se utilizó además un experimental in vitro en puntas de gutapercha para determinar la adherencia bacteriana y el efecto antimicrobiano en medio de cultivo de los extractos de cálices de H. sabdariffa. Los experimentos se replicaron tres veces. Se realizó un análisis exploratorio de datos para comprobar los supuestos de igualdad de varianzas y distribución normal de errores de los resultados obtenidos de la actividad antimicrobiana in vitro de los extractos cálices de H. Sabdariffa e irrigantes intraconducto. Los logaritmos de las UFC se analizaron con el programa estadístico Statgraphics Centurion para el análisis de varianza de una sola vía (ANOVA). Se realizó comparación de medias con la prueba de Tukey. Los resultados mostraron que todos los extractos de cálices de Hibiscus sabdariffa mostraron actividad antimicrobiana bactericida en las bacterias patógenas estudiadas teniendo resultasos similares a hipoclorito y clorhexidina. Los extractos con mejores resultados fueron los de acetato de etilo y acetona. Los componentes bioactivos de estos extractos son potenciales para su posterior uso en pruebas como irrigante intraconducto.