1. Universidad Autonoma del Estado de Hidalgo
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  3. Tesis de Doctorado
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Título : Evaluación del efecto anti-influenza, antioxidante y anti-inflamatorio del líquido celómico del erizo de mar comestible Tripneustes depressus.
Otros títulos : Ciencias de los Alimentos y Salud Humana.
Autor : Moreno García, Dulce María
Palabras clave : Erizo de mar
Líquido celómico
Influenza
Antioxidante
Anti-inflamatorio
Ciencias de los Alimentos y Salud Humana.
Fecha de publicación : 10-nov-2023
Editorial : ICSa-BD-UAEH
Descripción : El líquido celómico (LC) del erizo de mar tiene diversas funciones vitales como alimentación, excreción y defensa (sistema inmunitario). Algunos estudios revelan que el LC del erizo de mar Echinometra mathaei poseé actividad antioxidante e incluso actividad antiviral como la especie Tripneustes depressus. De acuerdo con lo anterior, el objetivo de esta investigación fue determinar el efecto anti-influenza, antioxidante y anti-inflamatorio del líquido celómico del erizo de mar, T. depressus. Para llevar a cabo este trabajo, primero se hizo la caracterización del LC (fenoles totales, Colesterol, HDL, LDL, triglicéridos, glucosa, algunos iones P3-, Ca2+, Mg2+, Na+, K+, Cl- y Fe2+, proteínas totales, lípidos totales). Posteriormente se evaluaron las actividades biológicas (anti-influenza, antioxidante y anti-inflamatorio) del LC íntegro y de su fracción obtenida por alentamiento a 72° C por 30 min y centrifugada a 11200 xg (SN72). Después se obtuvieron cuatro extractos con diferentes solventes: metanol (EMeOH), diclorometano (EDM), acetona (EA) y éter etílico (EEE), y una muestra resuspendida en PBS (EPBS) obtenidos del LC (EMeOHLC, EDMLC, EALC, EPDSLC y EEELC) o del SN72 (EMeOHSN72, EDMSN72, EASN72 y EPDSSN72), para conocer la actividad biológica también de ellos. La evaluación de la actividad anti-influenza se realizó mediante el ensayo de inhibición de la enzima neuraminidasa (IN) del virus de influenza A H5N2 in vitro, por el método del ácido tiobarbitúrico. Para la actividad antioxidante se realizaron ensayos in vitro de inhibición de los radicales ABTS•+ y DPPH•, así como el ensayo de FRAP. Para la actividad anti-inflamatoria se utilizó un modelo in vivo de edema auricular murino inducido por 13-acetato de 12-tetradecanoilforbol (TPA). Posteriormente, se identificaron por cromatografía de gases/espectrometría de masas (CG/MS) los compuestos presentes en el extracto con la mejor actividad biológica (EEELC). Finalmente, se hicieron ensayos in silico con las moléculas más abundantes encontradas en éste. Todos los ensayos se realizaron por triplicado y los resultados se analizaron mediante un ANOVA y prueba Tukey con el programa SPSS 20 (significancia p <0.05). Como resultados se observó que el líquido celómico de T. depressus tiene un pH de 7.4; además éste y el SN72 presentaron una alta concentración de Na+ (407.2 y 331.3 mmol/L, respectivamente) y Cl- (392.3 y 207.1 mmol/L, respectivamente); así como de lípidos totales con 311.9 y 316.8 mg/dL, respetivamente. En las actividades farmacológicas, se observó que el SN72 inhibe en un 46.5% la actividad de la neuraminidasa de H5N2. Para la actividad antioxidante, la mejor inhibición del radical ABTS•+ se obtuvo para el LC con 54.2%; mientras que para FRAP el mejor efecto se encontró con el SN72 (66.5 μM TEAC), el radical DPPH• no fue inhibido. Con respecto a la actividad anti-inflamatoria, el LC (4.2 mg) inhibió mejor la formación del edema auricular en un 45.5%. El comportamiento de los extractos en las pruebas farmacológicas fue el siguiente: el EEELC destacó en su capacidad de IN (93.7%), en el ensayo de FRAP (382.8 μM TEAC) y contra el radical DPPH• 7%; mientras que los EA (EALC y EASN72) fueron los que mejor inhibieron el radical ABTS•+ (65 y 64 % respectivamente); por último, todos los extractos mostraron un leve efecto anti-inflamatorio (<15%). Dado que el EEELC, fue el extracto con la mejor actividad biológica, se realizó la caracterización de los compuestos presentes por CG/MS. Se identificó al butilhidroxitolueno (BHT) como el compuesto más abundante, seguido del palmitato de etilo, estearato de etilo, palmitato de metilo, estearato de metilo y bis (2-etilhexil) éster isoftalato. Finalmente, todas estas moléculas fueron capaces de formar inteacciones con la neuraminidasa 1, 2 y 3 del virus de influenza A, donde la mejor postura de acoplamiento en el estudio in silico fue la NA1 con la molécula bis (2-etilhexil) éster isoftalato (ΔG= -6.0 Kcal mol-1), y con la NA2 y NA3 fue el butilhidroxitolueno (ΔG= -5.9 y -5.5 Kcal mol-1 respectivamente). Los resultados de este trabajo ponen de manifiesto que el LC del erizo de mar T. depressus es una fuente viable para el desarrollo de fármacos contra el virus de la influenza y sus efectos asociados.
Documento del Gobiberno : DRCA SH .15292 2023
URI : http://dgsa.uaeh.edu.mx:8080/bibliotecadigital/handle/231104/4480
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